L’absorbance est cruciale pour déterminer la concentration d’une substance dans un échantillon grâce à l’analyse colorimétrique. Les colorimètres mesurent l’intensité de la couleur et la transmission de la lumière par l’échantillon pour obtenir la concentration.
Fonction
Un colorimètre fonctionne en faisant briller une lumière blanche à travers un filtre optique dans une cuvette qui contient l’échantillon. En ajoutant un réactif de couleur à l’échantillon, la substance foncera en fonction de la quantité de concentration. L’obscurcissement (intensité) de la couleur est mesuré par la quantité de lumière absorbée par l’échantillon. Plus l’intensité est élevée, plus la concentration est élevée.
Importance
L’absorbance peut être définie comme une mesure logarithmique de la quantité de lumière à une longueur d’onde particulière prélevée par l’échantillon. Cette mesure est connue sous le nom de loi Beer-Lambert ou loi de la bière. La loi stipule que l’absorbance est égale à la concentration multipliée par la longueur du trajet de la lumière et le coefficient d’extinction molaire (la mesure dans laquelle la solution absorbe la couleur).
Importance de la couleur
La couleur de l’échantillon dépend de la transmission de la lumière et non de l’absorption. Par exemple, un échantillon est considéré comme rouge parce qu’il absorbe les longueurs d’onde bleu et violet. Par conséquent, dans cet exemple, la longueur d’onde de la lumière utilisée pour déterminer l’absorbance se situera dans la région bleue du spectre de couleur visible.
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