Les champignons peuvent être clonés en prenant une culture tissulaire et en la cultivant dans un milieu stérile fait d’une solution d’agar dextrose de pomme de terre, qui fournit les nutriments nécessaires à la croissance de la culture tissulaire. Une culture tissulaire exige qu’un morceau stérile de l’intérieur du champignon soit prélevé sur un champignon hôte. Le processus est similaire à la coupe d’un arbuste et à l’enracinement. La culture tissulaire produira des champignons identiques à ceux du parent.
Trancher les pommes de terre non pelées, placer dans la casserole, couvrir d’eau et cuire à feu moyen-élevé jusqu’à ce que les pommes de terre soient tendres.
Passer au tamis et placer le liquide des pommes de terre dans le bol en pyrex. Incorporer 28,4gr. de gélose et 2 c. à soupe de sucre, à la fourchette. Ajouter 1 qt. d’eau au mélange.
Presser une feuille de papier d’aluminium sur le bol en pyrex pour protéger le contenu. Ajouter 1 tasse d’eau à l’autocuiseur. Mettre le bol de mélange d’agar dans l’autocuiseur et assembler le couvercle. Cuire à feu moyen pendant 20 minutes à 15 psi. Démarrer la minuterie lorsque l’autocuiseur atteint 15 lb/po2. Laisser refroidir l’autocuiseur pendant une heure avant de l’ouvrir.
Disposez les boîtes de thon et de soupe propres dans une rangée, car elles tiendront les éprouvettes à un angle. Verser le mélange de gélose dans la tasse à mesurer et remplir les éprouvettes au tiers avec le mélange de gélose. Appliquer les bouchons sans serrer ou utiliser du papier d’aluminium pour couvrir les extrémités des éprouvettes. Placez trois tubes à essai remplis dans chaque boîte de soupe. Ajouter 1 tasse d’eau à l’autocuiseur. Placez les boîtes avec les tubes à essai dans l’autocuiseur, puis fixez le couvercle.
Stériliser les tubes à essai dans l’autocuiseur à 15 psi pendant 25 minutes. Démarrer la minuterie lorsque l’autocuiseur atteint 15 lb/po2. Laisser refroidir l’autocuiseur sur la plaque de cuisson pendant une heure.
Ouvrez l’autocuiseur et retirez soigneusement les éprouvettes chaudes à l’aide de gants de four et placez trois éprouvettes dans chaque boîte de thon pour les maintenir à la bonne inclinaison pour refroidir. Serrer les bouchons une fois que la gélose a refroidi et s’est transformée en gel. Recouvrir chaque boîte de tubes à essai d’une feuille d’étain pour empêcher la poussière d’entrer.
Vaporiser le comptoir de la cuisine avec de l’eau de Javel diluée dans l’eau et essuyer avec des essuie-tout. Travailler le matin pour éviter les courants d’air et les poussières en suspension dans l’air. Travaillez rapidement pour les étapes restantes.
Disposez les tubes à essai sur la table propre avec le couteau X-acto, les champignons, la lampe à alcool allumée et la quatrième boîte de conserve qui sera utilisée pour tenir la lame de couteau X-acto stérilisée à la flamme près de la flamme de la lampe à alcool.
Ouvrez soigneusement une éprouvette et placez-la entre le majeur et l’annulaire de votre main gauche si vous êtes droitier. Tenez le capuchon entre votre petit doigt et votre annulaire.
Cassez le champignon en deux et ne laissez pas le côté coupé toucher la table. Placez la lame du couteau X-acto dans la flamme, puis coupez un petit morceau de chair de champignon à l’intérieur et placez-le dans l’éprouvette. Replacez rapidement le bouchon et replacez le tube à essai avec la culture de tissu nouvellement créée avec le reste. Gardez la lame du couteau X-acto près de la flamme lorsque vous ne l’utilisez pas. Répétez l’opération pour les huit autres éprouvettes.
Placez du ruban-cache autour de la partie inférieure du couvercle et inscrivez la date et la variété sur le couvercle, à l’aide du marqueur Sharpie. Garder les éprouvettes préparées dans une pièce sombre à des températures entre 12,8 et 21,1 degrés Celsius pour permettre la croissance du mycélium.
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